凝胶渗透色谱(GPC)是一种强大的技术,可以直接测量分子量,这是表征天然和合成聚合物的关键属性。目前还没有通用的GPC系统能够根据尺寸单独分离每种聚合物,那么如何为您的样品选择专门定制的正确色谱柱呢?
选择流动阶段
这一切都始于移动阶段。你的样品聚合物溶于什么?不可溶解的聚合物不能用GPC进行分析,因此溶剂的选择至关重要。对于仅仅基于大小的高效GPC分离,最佳溶剂应该足够强,以最小化样品-柱的相互作用。
不要在决心上做出牺牲
当选择GPC色谱柱时,必须决定您的样品和标准所需的分辨率水平。记住这条黄金法则:分辨率和分离效率直接随色谱柱体积(孔隙体积)增加而增加。在购买任何柱组之前,应仔细考虑每一柱的长度和内径(ID)。我们建议:
- 使用较长的列,或多列串联(两个30厘米的列vs一个30厘米的列)¹
- 选择内径较大的柱(22毫米vs. 7.8毫米)
对于低分辨率的一个有利解决方案是在当前系统中包含一个附加列。“自由分辨率”可以通过提高柱温或为您的系统选择最佳的注射体积/浓度来获得。
孔隙大小问题
GPC采用非相互作用的固定相,由多孔网络组成,允许基于减小分子尺寸的洗脱顺序。混合床柱是一种线性柱,强烈推荐用于常规或未知的样品分析。柱的孔径应根据所分析聚合物的可疑分子量范围来选择。
“这只是一个阶段……”
让我们总结一下我们现在所知道的:
- 基于样品溶解度的色谱洗脱液,
- 基于所需分辨率的列数和维度数,
- 以及基于样品的怀疑MW范围的孔径
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