二维(2D)色谱如何帮助解决具有挑战性的HPLC分离和定量?
40多年来,高效液相色谱(HPLC)一直是分析化学家不可或缺的工具。由于各种分离机制(例如反相和正相)、多种检测器选项(ELSD、RI、UV、Corona CAD)和其他原因,它有助于分离和定量无数复杂基质中的痕量有机化合物。
我们知道,在大多数应用中,高效液相色谱(HPLC)是与单一色谱柱一起使用的。但是,使用两个色谱柱——具有非常不同的固定相——会怎么样?
进入2D HPLC:一种通过将一个色谱柱的流出物(或部分流出物)注入第二个色谱柱来显著提高分离能力的方法。在大多数情况下,第二列将具有互补的分离行为。
执行2D HPLC有两种基本方法:综合2D HPLC(或LCxLC)和心脏切割2D HPLC(或LC-LC)
有了LCxLC,完全洗脱液将第一列的第二列注入第二列。以2D方式重构峰值,如下所示:
- 信用证1.=第一个HPLC柱的分离
- 信用证2.=第二个HPLC柱的分离宽的第三个LC的基线分辨率1.峰值是通过LC实现的2.柱
用LC-LC,特定峰值选择来自第一个HPLC柱的(或保留时间范围)在LC上进行二次分离2.. 与LCxLC相比,可以实现特定峰的更大分离,如LC2.可选择色谱柱,以最大限度地提高LC中特定峰的分离效率1.(例如,较长的列)。
好吧,2D HPLC有什么好的?
首先,2D HPLC可以作为一种“直接”方法,以消除耗时和昂贵的样品制备步骤。当化学家面临复杂基质中微量有机化合物定量的极其困难的任务时,这对化学家来说是非常有价值的。
2D HPLC也可用于监测复杂混合物中的微小变化。这是通过评估样本的2D地图来实现的(见下文)。
总的来说,2D HPLC可以是一个完全自动化的过程,使用强大的软件可以大大加快方法的开发。