二维(2D)色谱如何帮助解决具有挑战性的高效液相色谱分离和定量?
40多年来,高效液相色谱(HPLC)一直是分析化学家不可或缺的工具。由于各种分离机制(例如反相和正常相),多种检测器选择(ELSD, RI, UV, Corona CAD)等,它帮助了无数复杂矩阵中痕量有机化合物的分离和定量。
我们知道,在大多数应用中,高效液相色谱是与单一色谱柱一起使用的。但是如果使用两列,有非常不同的固定相呢?
输入2D高效液相色谱法:一种通过将流出物(或一部分流出物)从一个柱注入到另一个柱来显著增加分离功率的方法。在大多数情况下,第二列会有互补的分离行为。
2D高效液相色谱有两种基本的执行方式:全面2D高效液相色谱(或LCxLC)和切心2D高效液相色谱(或LC-LC)
LCxLC,完整的洗脱液将第一列的值注入到第二列。各峰的二维重构如下:
- 信用证1=第一高效液相色谱柱分离
- 信用证2=第二色谱柱的分离基线分辨率宽,第三LC1峰值是通过LC实现的2列。
LC-LC,一个特定的高峰(或保留时间范围)在LC上进行二次分离2.与LCxLC相比,LC可以实现对特定峰的更大分离2
色谱柱的选择可以最大限度地提高色谱中某一特定峰的分离效率1(例如,一个较长的列)。
2D高效液相色谱有什么好呢?
首先,二维高效液相色谱是一种“直接”的方法,可以消除耗时和昂贵的样品制备步骤。当化学家面临定量复杂基质中痕量有机化合物的极其困难的任务时,这可能是非常有价值的。
2D高效液相色谱还可以用于监测复杂混合物中的微小变化。这是通过评估样本的2D映射来完成的(见下文)。
总的来说,2D高效液相色谱是一个完全自动化的过程,强大的软件大大加快了方法的开发。





